发布时间：2019-08-30
分子诊断技术能够准确检测身体机能的状况，医生根据检测结果做出合适的诊治方案，但如果样本的质量无法得到保证，就很可能直接影响到检测结果的准确性，容易造成严重的假阳性，在分子诊断试剂里一般设有内标监控检测过程，但无法监控到取样是否成功，而用RNaseP作为内标的话，则可以实现从取样开始的全过程监控，保证检测样本的质量是保证诊断结果准确性尤为重要的一步。
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什么是RNase P？
RNaseP，即为核糖核酸酶P，是由一条长链非编码RNA和十个蛋白质亚基组成的核糖核蛋白质复合物，可作用于催化切割RNA。
核糖核酸酶是人体内最重要的核酶之一，也是第一个被发现的蛋白质以外具有催化活性的生物大分子。
人源RNaseP分子模型
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RNase P的作用
RNaseP 作为人体的生理作用可以充分表现有机体的生命活动内部化学反应的有序性，核糖核蛋白复合体可以根据靶RNA设计的外部引导序列(EGS)能与靶RNA碱基互补结合，形成类似前体tRNA的二级结构，从而引导人类核糖核酸酶P对靶RNA进行特异切割。
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以RNase P作为内标的优势
RNA病毒检测的内标质控品一般有两种：质粒DNA、假病毒，但这些质控品都有各自的弱势：
◆质粒DNA在RNA病毒的RT-PCR中和样本不属于同源核酸，而且质粒易污染实验室，所以也不宜作为质控品对RNA进行监控。
◆假病毒作为外源性加入的物质，不能监控采样质量，并与检测样本起到竞争关系，可能影响到检测结果的准确性，并需要有一定的技术上的支持，操作比较繁琐。
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由于RNase P在人体各器官组织细胞中普遍存在，而且能够对人体来源样本的RNA核酸片段进行检测，同时也可以作为内标结合使用，并监测整个实验操作过程的准确性。
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对样本的采集起到监控的作用
PCR诊断中若需要口咽拭子的样本，一般是呼吸道疾病、肠道系统疾病，这些病毒感染性疾病最早感染的部位都是在咽喉部，若需要采集婴幼儿的口咽拭子样本，往往因为年龄小而控制能力不足所造成不愿配合或其咽喉窄小，增加了采集者在采集到有效、高质的临床口咽拭子样本的难度。
若荧光PCR平台所显示出的样本反应曲线和内标反应曲线均不起跳，则说明采集到的样本质量有可能出现问题或因为实验操作不当而出现假阴性，这需要引起医疗工作者的注意。而RNaseP内标可以对样本的采集起监控的作用，保障了检测结果的准确性。
可能出现监督的表现
根据儿童流感诊断与治疗专家共识（2015年版）指出：据估计，每年约有10～15%的儿童因流感感染而需就诊，小于5岁儿童感染流感后并发重症疾病的风险较高。
手足口病诊疗指南（2018年版）指出：手足口病是全球性疾病，我国各地全年均有发生，5岁以下儿童多发，发病率为37.01/10万～205.06/10万。
由此可见，呼吸道病毒、肠道病毒更容易侵染于婴幼儿，而此时的病原体确诊更有利于临床的指导用药，更好地保障婴幼儿的健康安全，因此RNaseP作为内标监控取样是否成功是病原体确诊的关键因素之一。
参考文献：
[1]宁容,张文军,李红枝.人类核糖核酸酶P的研究进展[J].国际药学研究杂 志,2008(04):251-255.
[2]儿童流感诊断与治疗专家共识(2015年版)[J],中华实用儿科临床杂.2015,30(17):1296-1303.
[3]《手足口病诊疗指南及解读(2018版)》出版[J].中国临床医生杂志,2018,46(09):1105.
（封面图片来源/网络）
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